- 董青;孙旭;李丹;汪尔康;汪劲;
外泌体携带细胞来源的生物分子信息,能够在多种体液中稳定存在,可作为疾病无创诊断与实时监测的潜在生物标志物。然而,现有的外泌体检测方法在检测复杂生物样本时,常存在特异性不高、灵敏度有限及难以区分不同细胞来源等不足。本研究开发了一种二氧化硅包覆上转换发光纳米颗粒(UCNPs@SiO_2)荧光生物传感平台,用于对胰腺癌细胞来源、同时过表达表皮生长因子受体(EGFR)与上皮细胞粘附分子(EpCAM)的外泌体进行表征。此平台采用级联信号放大策略,首先利用偶联CD63抗体的磁珠捕获外泌体,然后通过靶向EGFR和EpCAM的DNA适配体进行特异性识别,并触发滚环扩增(RCA)反应生成含重复序列的长链DNA产物,最后加入与RCA产物互补的UCNPs标记DNA探针,经孵育与磁分离后,检测上清液中游离UCNPs的荧光信号。实验结果表明,上清液的荧光强度随外泌体浓度升高而降低,呈负相关响应。此外,通过观察磁珠聚集程度可进行半定量裸眼分析,对EGFR与EpCAM阳性外泌体的最低可视分辨浓度分别为3.0×10~3particles/mL和6.0×10~3particles/mL。本方法实现了对特定细胞来源外泌体的高灵敏、双蛋白表型分析,为胰腺癌的无创诊断与治疗监测提供了新的方法学支持。
2026年03期 v.54 339-353页 [查看摘要][在线阅读][下载 2451K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 曾广祺;底浩楠;詹小贞;肖栩;陈军岩;胡芸芸;颜晓梅;
光谱纳米流式检测技术能够实现病毒和细胞外囊泡等纳米粒子的单颗粒多参数表征,但其性能受到现有光电倍增管(Photomultiplier tube, PMT)触发电子倍增电荷耦合器件(Electron-multiplying chargecoupled device, EMCCD)曝光策略的限制,存在检测粒径下限较高以及背景噪声大等问题。本研究构建了一种基于现场可编程门阵列(Field-programmable gate array, FPGA)控制的单光子计数雪崩光电二极管(Avalanche photodiode, APD)触发式高灵敏光谱纳米流式检测系统。此系统核心创新之处在于采用高量子效率APD结合光学空间滤波以显著抑制触发信号的背景噪声,利用FPGA构建高速信号处理链路,通过等精度测量与阈值算法实现0.2~30 MHz宽频信号的精准识别与同步触发,并优化光谱检测模块以提升荧光收集效率与分辨率。实验结果表明,此系统可清晰区分等效可溶性荧光分子(Molecules of equivalent soluble fluorochrome, MESF)值分别为574与1438的荧光硅球混合样品。在检测Di-8-ANEPPS标记的红细胞来源的细胞外囊泡(Red blood cell-derived extracellular vesicles, RBC EVs)时,空触发率从PMT触发时的>70%降低至<10%,并且目标信号峰与噪声基线可被有效分离。在对Alexa Fluor 488(AF488)/XFD488 Hydroxylamine(XFD488)与Di-8-ANEPPS双标记的RBC EVs检测中,成功实现了单颗粒水平重叠光谱的解耦及各种染料荧光贡献的定量分析。本研究为弱信号纳米生物颗粒的高通量、高精度光谱解析提供了关键技术支撑。
2026年03期 v.54 352-365页 [查看摘要][在线阅读][下载 4082K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 叶蜀燕;章伟伟;侯贤锋;
次氯酸根(ClO~–)作为一类重要的活性氧物质(ROS),是消毒剂与漂白剂的主要成分,被广泛用于水处理领域。然而,过量的ClO~–会对生态环境造成破坏,进而危害人体健康,因此开发高效便捷的ClO~-检测方法具有重要的现实意义。本研究以平面共轭的蒽醌衍生物为主要结构,通过简单的两步路线合成了新型荧光探针EN。吸收光谱结果显示,探针EN在410 nm处的吸光度与ClO~–浓度(0.028~10μmol/L)呈良好的线性关系。荧光光谱测试结果表明,在380 nm激发光作用下,探针EN在543 nm处出现强荧光发射峰,加入ClO~–后,此发射峰逐渐减弱,且荧光强度与ClO~–浓度(0.19~10μmol/L)呈良好的线性关系。探针EN能够实现ClO~–的快速比色和荧光双信号检测(响应时间<5 s),具有较低的检出限(比色法:27.44 nmol/L;荧光法:180.24 nmol/L),并表现出优异的选择性和抗干扰性,可在弱酸至弱碱的广泛pH范围内实现稳定检测。此外,本方法与现行国家环境保护标准方法的测试结果具有良好的一致性,应用于实际样品中ClO~-的检测时,回收率良好,且具备高准确性和高灵敏度,展现出广阔的应用前景。
2026年03期 v.54 362-375页 [查看摘要][在线阅读][下载 2125K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 李莎;雷皓珺;李雅琪;闫苗;任海仙;温维;
色胺是一种重要的吲哚类胺化合物,广泛存在于食品及生物体内,其过量积累会导致食物中毒,引发健康风险,因此,发展高效、特异的色胺检测方法对食品安全监管具有重要意义。本研究基于分子内电荷转移(ICT)机制,设计并合成了一种新型比率型荧光探针NR-1。此探针以苯甲酸酯为特异性识别基团,与色胺反应后,呈现比率型荧光响应,在378 nm处的荧光减弱,472 nm处的荧光显著增强。此探针对色胺具有良好的选择性和检测灵敏度,检出限(3σ)为0.26μmol/L。进一步将NR-1负载于棉棒载体,结合智能手机荧光成像,实现了对虾、鸡翅和芒果等食品在储存过程中释放的色胺的实时、可视化监测,并据此建立了荧光信号与储存时间的定量关系。本方法为食品新鲜度的原位、便携式检测提供了可靠的新策略。
2026年03期 v.54 372-383页 [查看摘要][在线阅读][下载 2044K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 张攀松;贺芳芳;白泽辉;谭一诺;常新;任晨霞;
氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD~+)是反映机体生理状态的关键指标,精准检测NAD~+水平对基础研究、医学诊断、环境监测及食品安全监管等均具有重要意义。然而,传统的NAD~+检测方法普遍存在检测周期长和操作成本高等问题,难以满足多样化场景下的实际应用需求。本研究基于连接酶的辅因子依赖性,结合DNA等温扩增技术,开发了一种新型NAD~+检测方法。本方法的检测流程分为3步:当体系中存在NAD~+时,Taq DNA连接酶催化寡核苷酸片段发生连接反应;Nt.BstNBI切刻内切酶与Bst聚合酶协同作用实现等温扩增,生成大量单链DNA;通过分子信标触发特异性荧光信号,实现NAD~+的定性和定量分析。结果表明,本方法仅需1~2 h即可完成NAD~+的检测,检出限(LOD)低至3.16 pmol/L,显著提升了检测效率与灵敏度。本方法有效突破了传统技术的多重限制,为医学诊断、环境监测及食品安全等领域提供了高效、经济的NAD~+的检测方法,具有广阔的产业化应用前景。
2026年03期 v.54 381-388页 [查看摘要][在线阅读][下载 908K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 冯如;尤悦苹;王瑜;谢欣;罗莎杰;杨晶艳;范雨;
开发了一种基于聚酰胺胺树枝状聚合物(PAMAM)改性氧化银(Ag_2O)纳米复合材料(Ag_2O@PAMAM)的多通道比色传感阵列,通过羟基修饰PAMAM提升Ag_2O在水相中的分散性,有效解决了传统Ag_2O纳米酶易聚集失活的缺陷。利用有机磷农药(OPs)对纳米酶Ag_2O@PAMAM的类过氧化物酶活性的特异性抑制作用,基于3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)、邻苯二胺(OPD)和2,2′-联氨-双-[3乙基苯并噻唑啉-6-磺酸]-二铵盐(ABTS)3种显色底物的差异化响应构建交叉反应传感界面,并结合模式识别算法解析多通道信号。实验结果表明,本传感阵列在代表性中药材黄芩基质中成功实现了甲基对硫磷、毒死蜱、除线磷、辛硫磷和草甘膦5种目标OPs的同步区分检测。本研究为复杂中药材体系中多残留农药的筛查提供了兼具高稳定性传感界面与高通量识别能力的新型平台。
2026年03期 v.54 389-404页 [查看摘要][在线阅读][下载 2149K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 朱国军;吴依洁;胡蓉钦;母昭德;
人附睾蛋白4(HE4)是卵巢癌的生物标志物之一,准确检测血清中的HE4浓度对卵巢癌的临床诊断至关重要。本研究开发了具有优异电化学活性的新型核壳双金属纳米材料(Zr-MOF-on-Ni-MOF)介导的电化学适配体传感器用于HE4的定量分析。采用聚苯胺(PANI)作为信号指示剂,以金纳米粒子(AuNPs)作为目标检测物与特异性适配体的连接桥梁。作为高效信号放大器的Zr-MOF-on-Ni-MOF及修饰在PANI表面的AuNPs可加速电极表面的电子转移,并通过交联固定适配体,与互补适配体共价结合,使生物传感器产生强烈的电化学信号,实现响应信号的双重放大,提高测定灵敏度。得益于Zr-MOF-on-Ni-MOF和AuNPs纳米复合材料的信号放大能力,本传感器具有宽线性范围(1 fmol/L~10 nmol/L)和低检出限(0.32 fmol/L),并显示出良好的选择性和稳定性。本传感器在卵巢癌临床诊断中具有广阔的应用前景,也为检测其它癌症生物标志物提供了新平台。
2026年03期 v.54 401-410页 [查看摘要][在线阅读][下载 1644K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 李紫琳;张振鹏;吕志堂;徐平;
N-琥珀酰亚胺基[三(2,4,6-三甲氧苯基)磷基]溴乙酸酯(TMPP-Ac-Osu,简称TMPP)标记可有效提升肽段离子化效率与质谱检测灵敏度,在免疫肽组学深度覆盖质谱鉴定中具有重要作用。然而,过量的TMPP标记试剂难以有效清除,严重干扰液相色谱分离与质谱分析。本研究针对TMPP标记肽段纯化中标记试剂残留的技术难题,建立了一种高效的质谱前处理方法。在TMPP与肽段质量比为2∶1的标记体系中,系统比较了C_(18)、强阳离子交换(SCX)柱和强阴离子交换(SAX)柱3种脱盐材料对肽段的保留能力及对TMPP的去除效果,通过提取各组分的特征色谱峰,并对比其信号强度与峰面积,评估了TMPP的残留情况。结果表明,SAX材料的肽段保留效率为84.1%,仅次于C_(18)(88.9%),表现出良好的肽段吸附性能;在TMPP去除方面,SAX柱处理组的TMPP残留信号显著低于其它两种材料,相较于C_(18)柱处理组下降了184倍。此外,经SAX柱处理后的肽段质谱检测的背景噪声低、信噪比高,谱图质量优良,肽段置信度评分更高。本研究建立了SAX柱为TMPP标记肽段样品前处理的最佳方案,可有效清除冗余标记试剂,保障免疫肽的高质量鉴定,为TMPP标记技术在免疫肽组学及其它相关领域的规模化应用提供了关键的方法学依据。
2026年03期 v.54 411-420页 [查看摘要][在线阅读][下载 1065K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 余海明;董亚蕾;欧红娟;王涛;刘晓萌;尚靖;岳芸芸;
针对现有雌激素检测技术存在的单一靶标局限性,本研究构建了基于活体成像的生物效应导向型方法,系统评估了荧光斑马鱼模型应用于化妆品基质中雌激素检测的适用性。通过Tol2转座酶构建雌激素反应元件驱动的绿色荧光蛋白(Tg(5×ERE:eGFP)~(cpu110))转基因斑马鱼,结合逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和转录组学方法解析了典型雌激素物质17α-乙炔雌二醇(EE2)的整体基因调控网络,确定其敏感窗口期为48 h。进一步的研究表明,此模型可同步检测9种雌激素类物质,包括《化妆品安全技术规范》(2015年版)禁限用的雌酮(E1)和雌二醇(E2)等典型内分泌干扰物。其中,己烯雌酚、炔雌醇及双烯雌酚的检出限(LOD, 0.04μg/g)与高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法的LOD(0.03μg/g)相当,定性分析结果与HPLC-MS/MS结果的符合度为100%。经“基因调控-荧光定量-仪器对标”三重验证,此模型兼具μg/g级灵敏度、高特异性及强抗基质干扰能力,为化妆品及原料中雌激素类内分泌干扰物的高通量筛查与风险评估提供了方法学支持,也为化妆品安全监管提供了高通量筛查工具。
2026年03期 v.54 421-439页 [查看摘要][在线阅读][下载 2792K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:1 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 张源;翟江丽;刘欣;张辉;唐杰;邢月;付占达;王磊;刘征原;柳鑫华;
以阿胶为碳源,采用微波法快速合成碳点(CDs)。以CDs为还原剂、HAuCl_4为金源,制备金纳米粒子(AuNPs);以AuNPs为晶种、多巴胺(DA)为还原剂、AgNO_3为银源,在碱性条件下采用种子生长法在AuNPs表面原位生长银壳,制备金核银壳纳米颗粒(AuNPs@AgNPs)。H_2O_2能氧化并刻蚀AuNPs@AgNPs表面的银壳,使Ag~0氧化为Ag~+,导致AuNPs@AgNPs在410 nm处的表面等离子共振吸收强度降低,并伴随着溶液颜色变化,基于此构建了用于检测H_2O_2的比色传感平台。考察了合成AuNPs@AgNPs时不同浓度的NaOH、DA和AgNO_3对H_2O_2检测性能的影响。在最优条件下,此传感器对H_2O_2表现出优异的分析性能,检出限为0.26μmol/L,线性范围为0.5~80μmol/L和80~180μmol/L。此外,基于葡萄糖在葡萄糖氧化酶作用下生成H_2O_2的反应,间接实现了葡萄糖的比色分析。随着葡萄糖浓度增加,体系颜色由橙黄色逐渐变为浅粉色,葡萄糖浓度在2~120μmol/L和160~1000μmol/L两段范围内与体系410 nm处的吸光度变化量(ΔA_(410))均呈现良好的线性关系,检出限为0.60μmol/L。将本方法用于人尿液中葡萄糖的检测,结果表明,尿液中的主要成分对葡萄糖测定不产生干扰,方法的特异性良好,加标回收率为94.0%~106.8%。将AuNPs@AgNPs比色传感平台固定在琼脂中,开发了便携式凝胶测试胶条,并成功用于葡萄糖的比色分析。
2026年03期 v.54 433-442页 [查看摘要][在线阅读][下载 1967K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 刘海霞;刘芳;梁敏娟;任玉霖;马明广;霍彩霞;
针对固相微萃取(SPME)中高性能涂层难以稳固负载的关键问题,本研究发展了超声辅助快速键合法。以机械性能优异的镍铬合金丝(NiCr)作为纤维基体、功能化层状双氢氧化物(LDHs)纳米片作为活性界面层,实现了共价有机框架亚微米球(COF SMSs)在纤维表面的快速、共价锚定,成功构建了结合牢固、结构均匀的LDHs@COF SMSs复合涂层。与商用聚二甲基硅氧烷(PDMS)和PDMS/二乙烯基苯(DVB)纤维相比,构建的NiCr@NiCr LDHs@COF SMSs纤维对双酚(BPs)展现出优异的吸附性能和良好的萃取选择性。提出了一种基于NiCr@NiCr LDHs@COF SMSs纤维对BPs进行快速预浓缩和高灵敏检测的SPME-高效液相色谱-紫外检测(SPME-HPLC-UV)分析方法。在优化的萃取条件下,5种BPs在0.02~200μg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数(R~2)>0.9990,检出限(LODs, S/N=3)为0.003~0.006μg/L,定量限(LOQs, S/N=10)为0.010~0.019μg/L。单根纤维的日内和日间检测相对标准偏差(RSDs)分别为1.46%~3.41%和2.70%~4.49%,纤维的批间重现性为3.36%~6.81%。将本方法应用于实际水样和牛奶样品中5种目标BPs的富集和测定,加标回收率为80.0%~118.8%, RSDs<7.79%。此外,NiCr@NiCr LDHs@COF SMSs纤维组装精密可控,可稳定使用120次以上。
2026年03期 v.54 443-459页 [查看摘要][在线阅读][下载 2575K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 韩悦;郭鹏然;卢柏舟;陈超;张建树;赵艳萍;
生物炭源溶解性有机质(DOM)的精准解析是评估其在环境中的迁移转化与生态效应的前提。本研究发展了一种基于纳升电喷雾-傅里叶变换离子回旋共振质谱(Nano-ESI-FT-ICR-MS)的直接进样分析方法,用于水稻秸秆生物炭源DOM的高分辨率分子表征,并与常规固相萃取-电喷雾电离-FT-ICR-MS(SPEESI-FT-ICR-MS)方法进行比较,系统评估了方法的分析性能。结果表明,在优化后的Nano-ESI分析条件(水/甲醇体积比1∶4、进样碳浓度5~10 mg/L)下,水稻秸秆生物炭源DOM的检出分子数由常规SPE-ESI的6736提升至10731,其中含硫和磷等杂原子化合物的数量显著增加。获得的DOM分子整体表现出更高的平均质荷比(m/z_(wa))和氢碳比(H/C_(wa))以及更低的氧碳比(O/C_(wa))、碳氧化态系数(NOSC_(wa))、双键当量(DBE_(wa))和改进芳香性指数(AI_(mod wa))。这些参数特征表明,本方法对强极性、长烷基链、低芳香结构的脂肪族类化合物及含硫磷大分子化合物具有更强的检测能力。本方法无需复杂的前处理过程,可有效避免SPE过程中存在的组分选择性损失和富集问题,为生物炭源DOM的全面、高灵敏分子表征提供了一种可靠的分析技术。
2026年03期 v.54 453-463页 [查看摘要][在线阅读][下载 5240K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 李路希;王瑛;杨琴;成小林;
贝叶是东南亚地区极具文化价值的传统书写载体,其主要成分木质纤维素易受霉菌侵蚀,导致材质脆化、信息残缺,严重威胁文物存续。为探究霉菌对贝叶的降解机理,本研究采用热裂解-气相色谱-质谱联用技术(Py-GC/MS),以及从贝叶经文物上提取的青霉菌、肉色曲霉菌和链格孢菌,对在28℃、80%相对湿度下模拟降解5周的贝叶样品进行了系统分析。通过对特征裂解产物的定性与半定量分析,揭示了木质纤维素各组分的降解路径与差异。研究结果表明,全纤维素为优先降解组分,其标志性产物左旋葡聚糖和糠醛的相对含量下降,导致全纤维素与木质素的比值(H/L)从初始的0.64降至第5周的0.56~0.24;木质素同时发生解聚,其热解产物中苯酚的相对含量在降解第1周即由0.09显著增加至0.20~0.24,短链苯酚类物质亦呈上升趋势;木质素的降解存在显著的单体选择性,紫丁香基单元(S)在降解初期相较于愈创木基单元(G)更易被降解,表现为S/G比值在第1周显著下降,但是S与G单体降解在1~5周呈现相对波动趋势。进一步解析了3种典型霉菌对贝叶木质纤维素的降解机理,从分子层面揭示了贝叶木质纤维素各组分的差异化降解路径。本研究为后续贝叶经及其它木质纤维素文物的霉变机理研究与针对性保护策略的制定提供了关键的实验依据与分子标志物。
2026年03期 v.54 464-476页 [查看摘要][在线阅读][下载 1675K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 尤申;韩惠琳;梁爽;严景丽;张庆;吕庆;
艾叶是中医吸入疗法的代表性草药之一,具有多种治疗特性。然而,艾叶的挥发性成分表征尚不完善,其气味化合物、药理活性物质、潜在化学风险物质及在不同临床应用时的含量水平亟待进一步研究。本研究通过建立的顶空气相色谱-四极杆-飞行时间质谱非靶向分析方法,在40℃和180℃两个应用场景下,从10批次艾叶样品中共鉴定出215种挥发物,进一步识别出15种主要气味物质(相对气味活度值(ROAV)≥0.1),关键气味贡献者包括香草醛、苯乙酸、间甲酚、桉叶油醇和苯乙醛等。进一步研究发现,180℃下的药理活性物质数量(15种)和峰面积显著高于40℃(11种),特别是(-)-桉油烯醇、丁香酚、α-水芹烯和石竹素仅在180℃时被检测到,表明艾灸过程能释放更丰富的药效物质群,可能具有更广谱的药理作用潜力。同时,180℃下的艾叶释放出的化学风险物质的数量和峰面积也显著高于40℃,表明180℃条件下艾灸释放的化学风险物质增多。本实验结果强调了遵循“最小有效剂量”的原则以避免过度暴露的重要性。本研究不仅为优化艾叶在吸入疗法中的临床应用提供了科学依据,也为其它中药未知挥发性成分的分析提供了参考。
2026年03期 v.54 472-484页 [查看摘要][在线阅读][下载 1748K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 墨淑敏;祝利红;李爱嫦;李甜;
研究了电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定稀土氧化物及氯化物中钾(K)时存在的质谱干扰。对单杆-ICP-MS(Q-ICP-MS)碰撞反应池中氢气(H_2)的流量进行优化,能够有效消除~(38)Ar~1H~+对~(39)K~+测定的质谱干扰。同时,仪器残留的氯以及稀土氯化物中的氯也会导致~(39)K~+测定结果异常。采用三重四极杆-ICP-MS(QQQ-ICP-MS)对氯的干扰机理进行了深入研究。分别在No gas和H_2串接模式下测定氯的产物离子,结果表明,No gas条件下~(37)Cl~+为主要存在形式,而在H_2碰撞反应池内约97%的~(37)Cl~+转化为3。设置Q1=39,~(37)Cl~+无法通过前置质量分析器进入碰撞反应池;优化了气体流量,在H_2流量为6 mL/min或O_2流量为0.75 mL/min时可以实现K含量的准确测定。不同稀土氧化物及氯化物基体中K的方法检出限为0.03~0.20 ng/mL。基体效应显著,信号受到抑制。基体浓度为1 mg/mL时,采用标准曲线法以Sc为内标测定Lu_2O_3和LaCl_3中的K含量,相对标准偏差(n=7)小于5%,加标回收率为95.9%~105.0%。基体浓度为5 mg/mL时,采用标准加入法测定Y_2O_3中的K含量,H_2和O_2模式测定结果分别为0.000073%和0.000074%。
2026年03期 v.54 481-489页 [查看摘要][在线阅读][下载 1040K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 闫蕊;
为解决质谱流式细胞术现有聚合物或纳米颗粒标签分子量分布宽、偶联均一性差及空间位阻大等问题,本研究采用可控固相多肽合成法结合迭代式嵌段偶联合成策略,制备出结构精确的多肽寡聚质量标签8DOTA-PEG_3-Mal,采用质谱表征对其分子结构进行了确证。此标签具有空间位阻低、与抗体偶联效率高的优势。凝胶电泳银染结果显示,标记后的抗体重链和轻链分别偶联2个和1个标签,每个抗体分子可稳定负载48个金属离子,偶联均一性优异。染色指数与分离指数分析表明,此标签标记的CD45抗体在Jurkat/HeLa细胞染色中表现出高特异性与高灵敏度。在外周血单核细胞多参数检测中,标签标记的抗体能够精准区分淋巴细胞亚群,且各细胞群比例与商品化Maxpar X8试剂标签的检测结果高度吻合。抗体-标签偶联物在4℃储存120 d后检测信号无明显衰减,表明其具有良好的长期储存稳定性。综上,8DOTA-PEG3-Mal标签兼具优良的金属螯合能力、低空间位阻及高效抗体偶联效率,为质谱流式细胞术提供了结构可控、工艺简化、性能稳定的新型金属标签平台,具有良好的应用潜力。
2026年03期 v.54 490-499页 [查看摘要][在线阅读][下载 1190K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ] - 王典;王群;孙诗涵;卜丽雯;刘怡漫;李婉明;
外泌体作为液体活检中极具潜力的靶标,其表面的蛋白可作为肿瘤特异性生物标志物,为肿瘤早期诊断提供了无创、动态检测新策略。转移性结直肠癌(CRC)是全球死亡率最高的癌症之一,通过液体活检分析外泌体,对于癌症的早期诊断具有重要意义。本研究选择前期工作中筛选的完整外泌体的核酸适配体中的1条候选序列Q2,详细探讨了其对转移性CRC源性外泌体的结合特性。适配体Q2对转移性CRC来源的外泌体具有高亲和力和高特异性,以及良好的生物稳定性。通过酶处理实验,推测Q2结合的靶标为外泌体表面的膜蛋白。基于Q2对转移性外泌体的特异性结合,成功构建了基于适配体Q2的外泌体定量检测系统,检出限为6.8×10~5particles/μL,实现了对临床CRC患者血浆外泌体的检测,为肿瘤的早期诊断和治疗提供了新的途径。
2026年03期 v.54 500-508页 [查看摘要][在线阅读][下载 1418K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] |[下载次数:0 ] |[网刊下载次数:0 ]