- 陈薇;吕梦绮;宋阳;
液滴微流控技术通过将反应体系分割为皮升至纳升级别的独立液滴单元,为酶促反应研究提供了革命性工具。该技术通过微通道设计,利用T型通道、流动聚焦或共轴流动等方法生成单分散液滴,其核心优势在于高通量、低样本消耗、精准调控微环境以及液滴间隔离性,能够有效避免交叉污染并模拟天然微环境,显著提升酶学研究的效率和维度。液滴微流控技术在酶促反应中应用广泛,包括酶的定向进化和固定化酶研究等。本文系统综述了液滴微流控技术的背景、在酶促反应中的应用优势及其在酶促反应中的应用研究进展,并对其面临的挑战与未来的发展方向进行了展望。
2025年12期 v.53 1953-1963页 [查看摘要][在线阅读][下载 1382K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:5 ] |[下载次数:31 ] |[网刊下载次数:0 ] - 胡欣言;张倬毓;张鹏飞;
病原体的快速精准检测是公共卫生防控的关键环节之一。传统的核酸检测技术如实时荧光定量聚合酶链式反应和等温扩增等的灵敏度较高,但存在操作复杂和气溶胶污染等问题,难以满足病原体现场快速检测的需求。近年来,基于规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas)系统的无扩增核酸检测技术因具有高特异性、快速响应和检测过程简便等优势,已成为病原体核酸检测技术发展的新方向。本文总结了近三年CRISPR/Cas系统在无扩增病原体核酸检测领域的研究进展,对5种的常见CRISPR/Cas系统(Cas9、Cas12a、Cas12b、Cas13a和Cas12f)及其用于核酸检测的原理进行了介绍,系统梳理并分类阐述了基于不同原理的CRISPR无扩增核酸传感策略,主要包括超灵敏信号(包括电化学、电化学发光和新型光学信号)和各类信号放大策略(包括CRISPR RNA(crRNA)/酶级联和微纳限域)。针对CRISPR/Cas系统面临的样本预处理繁琐、操作流程复杂、难以实现多重检测及原型间隔序列邻近基序(PAM)依赖等挑战,探讨了潜在的解决方案与未来的发展方向,总结了CRISPR/Cas无扩增检测技术在病原体诊断中的优势与产业化前景,重点探讨了传感器稳定性、试剂标准化和临床转化等问题,以期为基于CRISPR/Cas系统的无扩增核酸检测技术向高灵敏、可多重检测和具有现场即时检测能力的新一代诊断平台发展提供参考。
2025年12期 v.53 1964-1982页 [查看摘要][在线阅读][下载 2079K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:4 ] |[下载次数:6 ] |[网刊下载次数:0 ] - 林婷;孙琪;王燕华;王晓芬;
直接质谱分析技术通过“去培养化”策略,在简易前处理(如化学裂解)辅助下,直接电离细菌释放的蛋白质、代谢物等生物分子,生成特征指纹图谱,从而克服了传统细菌检测方法依赖培养、耗时长及假阴性率高的缺点,在临床诊断、食品安全及环境监测等领域具有显著优势。本文系统对比了基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)、电喷雾电离质谱(Electrospray ionization-mass spectrometry, ESI-MS)及新型离子源技术(如纸喷雾电离(Paper spray ionization, PSI)、二次电喷雾电离源(Secondary electrospray ionization, SESI)和实时直接分析离子源(Direct analysis in real time, DART))的原理与性能,总结了近年来直接质谱分析技术在细菌检测中的研究进展。其中,MALDI-TOF MS在临床细菌鉴定中的准确率超过95%,检出限低至飞摩尔级别;新型离子源技术(如DART)对血清内毒素的检出限低至0.03 ng/mL,检测时间可缩短至10 min。目前,直接质谱技术用于细菌检测面临的挑战在于数据库覆盖不足、近缘菌种鉴别困难及复杂基质干扰,未来研究应聚焦于仪器便携化、人工智能辅助数据分析及多组学联用,为耐药菌防控与精准医疗提供高效的分析工具。
2025年12期 v.53 1979-1989页 [查看摘要][在线阅读][下载 1202K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:3 ] |[下载次数:18 ] |[网刊下载次数:0 ] - 殷勤红;吕建华;陈俊秋;陈蕾;张硕玲;李唯;李云鹏;朱艳琴;
毒品严重危害人类社会,研发快速、灵敏、特异的毒品检测新方法是禁毒领域的迫切需求。适配体是一类通过指数富集配体系统进化技术筛选出的单链DNA或RNA分子,因具有高亲和力、高特异性及良好的稳定性,被誉为“化学抗体”。适配体生物传感器通过适配体的高特异性分子识别与多模态信号转换的协同作用,为毒品检测提供了一种兼具高灵敏度、高选择性与实时检测的研究思路。本文重点阐述了适配体生物传感器的识别原理与检测方法,系统综述了荧光、电化学、比色及表面增强拉曼散射等适配体生物传感器在各类毒品检测中的最新应用进展,分析了其在适配体筛选、传感器构建与禁毒实战应用中面临的挑战,并对未来发展方向进行了展望,旨在为生物传感器在毒品检测领域的研究与应用提供参考与借鉴。
2025年12期 v.53 1988-2000页 [查看摘要][在线阅读][下载 1140K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:4 ] |[下载次数:44 ] |[网刊下载次数:0 ] - 李博展;吴青霞;李运宏;孙文惠;尚林伟;王慧捷;尹建华;
随着航天事业的快速发展,微重力环境下的关节退变研究,尤其是关节软骨因机械负荷变化引发的退行性改变研究,已成为航天医学领域的重要课题。本文综述了生物化学分析、磁共振成像(MRI)、生物力学测试、显微成像及红外光谱学技术用于微重力环境下关节软骨退变研究的最新进展。在微重力环境下,上述前4种方法被分别用于解析软骨的分子代谢、揭示软骨形态学及力学特征,但存在破坏样本和动态监测能力不足等局限;而中、近红外光谱技术凭借其无损检测和分子指纹识别优势,结合机器学习算法,不仅在常规条件下展现出软骨成分动态分析及早期退变鉴别的潜力,而且在模拟微重力条件下的实验研究中初步验证了其原位无创检测的可行性。尽管红外光谱技术在关节退变研究中仍处于初步探索阶段,但已表现出显著的优势与潜力,未来可与机器学习算法及多模态技术融合,有望实现空间站原位无创监测,为航天员的健康保障与临床关节疾病诊疗提供新策略。
2025年12期 v.53 2001-2008页 [查看摘要][在线阅读][下载 786K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:2 ] |[下载次数:2 ] |[网刊下载次数:0 ] - 贾欣;蒋尚颖;王若馨;闫存玉;
活性甾体激素是维持内分泌平衡与调节代谢过程的关键物质,对其进行精准定量分析对临床诊断与治疗监测至关重要。然而,由于甾体激素结构相似且样本基质复杂,其精准定量分析极具挑战。传统免疫分析法虽操作简便,但易受基质干扰和交叉反应影响,导致假阳性结果。色谱-质谱联用技术凭借高效分离能力和宽线性范围,展现出良好的检测准确性与可靠性;液-液萃取及固相萃取等样品前处理方法可有效富集纯化目标物,降低基质效应;衍生化技术结合同位素内标法可提高检测灵敏度和准确性。本文系统综述了近年来活性甾体激素的色谱-质谱定量分析方法的研究进展,重点阐述了色谱-质谱联用技术的创新应用及当前存在的发展瓶颈,并对样品前处理方法与衍生化策略进行了深入分析,最后对其未来发展前景进行了展望。
2025年12期 v.53 2009-2019页 [查看摘要][在线阅读][下载 919K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:2 ] |[下载次数:12 ] |[网刊下载次数:0 ] - 刘恒钦;孙杰;闵红;安雅睿;刘曙;
近年来,深度学习(DL)在光谱分析领域取得了显著进展,通过DL模型对光谱数据的高效处理和特征提取,极大地提升了分析精度和泛化性能。然而,深度模型的“黑箱”特性导致决策过程难以理解,制约了其广泛应用。为突破这一限制,光谱DL模型的可解释性研究近年来受到广泛关注。本文综述了2019~2025年光谱DL模型的可解释性研究进展,概述了一维卷积神经网络(1D-CNN)和Transformer等典型DL模型在光谱数据处理中的特征提取机制,从特征重要性评估、模型推理过程可视化和内在可解释性等方面综述了各类可解释性方法的原理、特点及其在光谱分析中的适配性。特征重要性包括基于梯度的方法以及基于扰动的方法;推理过程包括数据降维和卷积层特征图等可视化方法;内在可解释性包括引入物理机理约束与设计可解释的功能模块;多维度解释结合多种可解释性方法,对“黑箱”模型进行全面的解释。这些方法不仅提高了模型预测的透明度与可靠性,也为关键光谱区间的识别和机理解析提供了科学依据。现有研究仍面临分类体系不完善、评价体系缺乏、透明度与预测性能难以兼顾等挑战。未来的研究应开发具有物理约束的内在可解释模型,探索模型性能与可解释性的协同优化,开展不同可解释方法的多维度应用,建立科学的评价体系,推动可解释光谱DL模型的应用拓展。
2025年12期 v.53 2020-2031页 [查看摘要][在线阅读][下载 888K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:4 ] |[下载次数:77 ] |[网刊下载次数:0 ]
- 齐琦;董睿之;柳玉蓉;周霞;李倩;李秀琴;张庆合;
为满足食品等领域中低聚果糖(FOS)检测的计量溯源需求,研制了蔗果四糖三水合物纯度标准物质。通过核磁共振波谱(NMR)、质谱(MS)和X射线衍射(XRD)对纯品原料进行全面定性分析。其中,NMR分析除氢谱(1H NMR)和碳谱(13C NMR)外,还结合1H-1H相关谱(COSY)、异核单量子相干谱(HSQC)及异核多键相关谱(HMBC),明确了糖基单元、立体化学构型及糖苷键连接位点。采用质量平衡法与定量NMR法联合进行纯度定值:质量平衡法中,采用高效液相色谱-电雾式检测器(HPLC-CAD)定量分析结构相关杂质,卡尔费休库伦法(卡式炉进样)测定水分,顶空气相色谱-氢火焰检测器(GC-FID)分析挥发性有机溶剂残留,电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定无机杂质;定量NMR法以氘水(D_2O)为溶剂、邻苯二甲酸氢钾为内标。采用HPLC-CAD考察了标准物质的均匀性和稳定性,系统评估了研制过程中定值、均匀性及稳定性等引入的不确定度。结果表明,蔗果四糖三水合物纯度值为99.2%,相对扩展不确定度为0.3%(k=2)。本研究制备的标准物质可为FOS相关检测结果的溯源性、可比性和准确性提供保障。
2025年12期 v.53 2032-2042页 [查看摘要][在线阅读][下载 1435K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:4 ] |[下载次数:12 ] |[网刊下载次数:0 ] - 赵欣;于淳旭;吕佰阳;唐艺丹;刘晓亮;翟雨欣;李艳茹;孟繁峥;李冰凌;
百日咳是由百日咳博德特氏菌(BP)引起的一种急性呼吸道传染病,具有传染性强、病程长的特点。婴幼儿由于免疫力弱,感染百日咳后可能产生严重的并发症,甚至危及生命。本研究开发了环介导等温扩增技术和无酶核酸分子线路技术联用的一步法检测平台(LAMP-CHA),用于百日咳博德特氏菌的检测。本平台利用环介导等温扩增实现靶标基因的指数放大,其扩增产物被无酶核酸分子线路特异性识别,并释放荧光信号。采用LAMP-CHA检测平台能够检出浓度低至1 copy/μL的百日咳博德特氏菌保守基因,具有优异的灵敏度和特异性。采用LAMP-CHA平台对实际样本进行分析,结果表明,此平台可靠、实用,为百日咳的临床诊疗提供了高效和精准的检测方法。
2025年12期 v.53 2043-2049页 [查看摘要][在线阅读][下载 833K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:5 ] |[下载次数:12 ] |[网刊下载次数:0 ] - 杨家琴;马明明;
1-甲基环丙烯(1-Methylcyclopropene, 1-MCP)可作为果实保鲜剂,提升农产品的贮藏品质并延长货架期,其浓度对保鲜效果至关重要。因此,检测1-MCP含量对果蔬保鲜品质具有重要意义。本研究采用多扫循环伏安法在铅笔芯电极(PEC)表面制备聚β-环糊精(Poly-β-cyclodextrin, Eβ-CD),并通过电子顺磁共振(EPR)、拉曼光谱、孔径分析仪(BET)及电化学阻抗谱等进行了表征。实验结果表明,与自吸附β-CD相比,Eβ-CD表面空位缺陷更多、介孔数量更丰富、比表面积更大且阻抗最小,其结合1-MCP前后的零电流电位值变化最大且稳定性良好,据此建立了基于E β-C D零电流电位的1-M C P检测方法。在0.01~100μmol/L浓度范围内,Eβ-CD的零电流电位(E_(ZCP))与1-MCP浓度的自然对数呈线性关系,1-MCP的检出限(LOD)为0.008μmol/L,定量限(LOQ)为0.01μmol/L。样品中可能共存的无水乙醇(C_2H_6O)、β-CD以及Na~+、Ca~(2+)、Cu~(2+)和K~+等金属离子均不干扰1-MCP的测定。将本方法用于3种实际样品中1-MCP含量的测定,模拟样品的平均回收率为94.4%~106.7%,实际样品1和样品2的加标回收率分别为98.5%~106.0%和100.0%~102.6%。
2025年12期 v.53 2050-2061页 [查看摘要][在线阅读][下载 1420K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:2 ] |[下载次数:3 ] |[网刊下载次数:0 ] - 刘文驰;曹婷苇;彭媛媛;刘鑫伟;黄立芃;刘晓会;冯美卿;赵琳静;
玫瑰油(Rose essential oil, REO)对痤疮丙酸杆菌(Cutibacterium acnes, C. acnes)的生长具有抑制作用。本研究采用扫描电子显微镜、荧光光谱以及基于气相色谱-飞行时间质谱(Gas chromatography-time-offlight mass spectrometry, GC-TOFMS)的微生物代谢组学(Microbial metabolomics)等技术,并利用多元统计及机器学习特征选择算法,研究了REO抗C. acnes作用的分子机制。结果表明,REO对C. acnes的最小抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration, MIC)为0.025%(V/V),最小杀菌浓度(Minimal bactericidal concentration, MBC)为0.050%(V/V)。REO暴露下C. acnes进入对数生长期的时间显著延滞,且延滞时间随REO浓度增大而延长。亚抑菌浓度的REO造成菌体产生不同程度褶皱、凹陷及破损,影响细胞膜的通透性和完整性,且呈现明显的量效关系。通过高覆盖性代谢足迹(Metabolic footprinting)分析,经FiehnLib和自建数据库比对,共鉴定出254种代谢物。采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)及Student′s t检验,结合基于Scikit的随机森林递归特征消除(Random forest recursive feature elimination, RFRFE)算法和生物信息学分析,共获得12种与REO抗C. acnes强关联的特征标记物。这些代谢标记物主要涉及苯丙氨酸/酪氨酸和色氨酸生物合成、甘氨酸/丝氨酸和苏氨酸代谢、精氨酸生物合成、叶酸一碳库和谷胱甘肽代谢等代谢通路(p<0.05,FDR<0.05)等。与细菌能量代谢、氮代谢、核苷酸合成和抗氧化防御相关的靶标,如延胡索酸水合酶(FH)、丝氨酸脱水酶(SDS)、谷氨酸脱氢酶(GLUD1)、谷氨酰胺合成酶(GLUL)、丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT1)和谷胱甘肽合成酶(GSS)等,可能与此相关。本研究采用微生物代谢组学和机器学习策略,为深入揭示REO抑制C. acnes的代谢调控机制提供了参考。
2025年12期 v.53 2060-2073页 [查看摘要][在线阅读][下载 2799K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:2 ] |[下载次数:43 ] |[网刊下载次数:0 ] - 胡力飞;吴新;吴涛;黄智安;杨烨辉;殷涛;廖香莲;刘明星;孙代华;
建立了黄芪的超高效液相色谱-紫外-蒸发光散射(Ultra-high performance liquid chromatography-ultraviolet-evaporative light scattering detection, UPLC-UV-ELSD)指纹图谱及其多成分定量分析方法,并结合化学计量学对不同产地的黄芪进行对比分析。采用UPLC-UV-ELSD法建立了37批不同产地黄芪的指纹图谱,对各黄芪样本及18个共有峰进行化学计量学分析,对6种异黄酮类和皂苷类成分进行定量分析。聚类分析(Cluster analysis, CA)和主成分分析(Principal component analysis, PCA)结果表明,甘肃省相邻产地(定西市和陇南市)的样本较为相近;内蒙古自治区包头市及乌兰察布市两地样本的差异相对较大;样本可分为甘肃省定西市和陇南市、山西省大同市、内蒙古自治区包头市和乌兰察布市4类,且成分与产地之间呈相关性。利用正交偏最小二乘判别分析(Orthogonal partial least squares discriminant analysis, OPLS-DA)筛选出13种差异性标志物,实现了对4类产地样本的有效区分。6种成分(毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪皂苷Ⅱ和黄芪皂苷Ⅰ)的定量分析结果显示,不同类型成分(异黄酮苷、异黄酮苷元及黄芪皂苷)的含量变化趋势较相近,且甘肃省定西市和陇南市两地样本中的6种成分含量均较为相似,与化学计量学分析结果一致。本方法高效、可靠,结合化学计量学可为黄芪的质量研究及应用提供参考。
2025年12期 v.53 2074-2090页 [查看摘要][在线阅读][下载 2243K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:4 ] |[下载次数:90 ] |[网刊下载次数:0 ] - 周武平;陈奕良;李必冬;徐晓龙;刘长宇;
高锰酸盐指数(COD_(Mn))是评估水中溶解性有机物污染程度的重要指标。国家标准测定方法的线性范围较窄,高浓度样品需稀释后测定。本研究基于国家标准方法和碘化钾分光光度法,对超量程浓度的草酸钠、葡萄糖和有证标准样品进行多梯度稀释后测量。结果表明,梯度稀释对草酸钠样品基本无影响,但对于葡萄糖和有证标准样品,两种方法的测量误差分别高达-52.09%和-52.38%;不同稀释比例的实际样品测量误差高达-19.71%。上述研究结果表明,稀释虽然是国标方法规定的超量程浓度样品测量前的预处理步骤,但因COD_(Mn)测定体系存在非完全氧化特性,测量结果易受稀释比例影响而产生显著分析偏差。本研究结果为推动国家标准分析方法在测量流程及质控管理方面的改进与更新提供了参考。
2025年12期 v.53 2085-2092页 [查看摘要][在线阅读][下载 876K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:3 ] |[下载次数:21 ] |[网刊下载次数:0 ] - 贺伟华;苏柳;刘聪;张干;章钢刚;赖晓翠;邓省亮;
以己烯雌酚模拟表位保守序列YVYP为骨架,采用人工编码方式设计并合成了随机七肽核苷酸序列,通过扩增获得编码随机七肽的基因片段,利用分子生物学技术构建噬菌体展示己烯雌酚模拟表位随机七肽库。采用三轮亲和淘选,获得己烯雌酚新的模拟表位,并以其替代传统化学合成的检测抗原,建立了基于抗原模拟表位的己烯雌酚免疫学检测方法。结果表明,构建的噬菌体展示己烯雌酚模拟表位随机七肽库的库容量为1.23×10~6pfu,重组阳性率为90%,插入序列不同率为93.3%,己烯雌酚新模拟表位的氨基酸序列为YVYPQMP。基于此噬菌体模拟表位建立的噬菌体酶联免疫吸附分析(Phage-ELISA)方法的半数抑制浓度(IC_(50))为0.146 ng/mL,检出限(IC_(10))为0.029 ng/mL,线性范围为0.03~1.00 ng/mL,具有良好的选择性。采用本方法检测鸡肉、鱼肉和虾肉中的己烯雌酚,加标回收率为81.0%~94.1%,相对标准偏差为4.6%~8.3%。本方法灵敏度高、特异性好,适用于动物源性食品中己烯雌酚的测定。
2025年12期 v.53 2093-2108页 [查看摘要][在线阅读][下载 1276K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:2 ] |[下载次数:9 ] |[网刊下载次数:0 ] - 商倩倩;吴彬;张源;向阳;姚远;沈先涛;
针对酒类产品中痕量苯酚类化合物的分析需求,建立了基于原位形成低共熔溶剂的分散液液微萃取方法,结合高效液相色谱-荧光检测技术,实现了啤酒中4-甲基苯酚、4-乙烯基苯酚和4-乙基苯酚的快速准确分析。考察了萃取剂种类及用量、盐析效应和萃取时间对萃取效果和富集能力的影响,得到最佳萃取条件为:以1.0 mL十一醇为萃取剂,添加5.0%(m/V) NaCl,涡旋萃取3.0 min。在上述条件下,目标物的回收率均大于80.0%,富集因子为8.2~9.6。方法验证结果表明,3种目标物在相应浓度范围内均具有良好的线性关系(R~2>0.997),检出限为1.03~5.28μg/L,定量限为3.43~17.59μg/L,准确度为93%~113%,相对标准偏差均低于12%。采用基于原位形成低共熔溶剂的分散液液微萃取-高效液相色谱-荧光检测方法分别对市售拉格啤酒、世涛啤酒及酸啤酒3种品类共4款样品中的4-甲基苯酚、4-乙烯基苯酚和4-乙基苯酚的含量进行分析,分析结果稳定且符合产品特点。本方法简单高效、绿色环保、分离与富集效果好,适用于啤酒等基质复杂的酒精饮料中苯酚类化合物的快速准确分析。
2025年12期 v.53 2104-2115页 [查看摘要][在线阅读][下载 1199K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:3 ] |[下载次数:25 ] |[网刊下载次数:0 ] - 黄紫薇;王迎辉;王芳焕;孟哲;
粮食安全对于国家经济发展及公众健康具有重要意义。针对谷物中黄曲霉毒素B_1(AFB_1)与赭曲霉毒素A(OTA)共存污染的高灵敏检测需求,本研究将功能化的适配体余辉发光纳米粒子(Apt-PLNPs)与其互补DNA链修饰的Fe_3O_4磁性粒子(cDNA-Fe_3O_4)相结合,开发了一种磁分离双色持久发光适配体传感器(Apt-PLNPs@cDNA-Fe_3O_4)。目标分子AFB_1和OTA通过与传感器中各自的适配体(Apt_1和Apt_2)发生竞争性结合,形成AFB_1-Apt_1-Zn_2GeO_4∶Mn~(2+)(ZGM)及OTA-Apt_2-Zn_1._(25)Ga_1._5Ge_0._(25)O_4∶Cr~(3+),Yb~(3+),Er~(3+)(ZGGOC)复合物,促使cDNA_1-Fe_3O_4和cDNA_2-Fe_3O_4解离。长余辉纳米粒子ZGM在535 nm波长处以及ZGGOC在700 nm波长处分别释放对应的余辉发光信号,从而实现对AFB_1和OTA两种真菌毒素的快速、无背景干扰且高度特异性的同步定量检测。ZGM和ZGGOC的余辉发光强度与AFB_1和OTA浓度在0.001~50 ng/mL范围内呈良好的线性关系,检出限分别低至3.4×10~(–4)ng/mL和3.7×10~(–4)ng/mL。将构建的Apt-PLNPs@cDNA-Fe_3O_4传感器应用于谷物样品中AFB_1和OTA含量的检测,回收率为93.5%~101.2%。本研究为谷物中霉菌毒素污染的早期预警提供了一种创新且有效的检测策略。
2025年12期 v.53 2114-2124页 [查看摘要][在线阅读][下载 1388K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:2 ] |[下载次数:22 ] |[网刊下载次数:0 ] - 王品;何臻;彭邹君;余章聪;吴爱国;李娟;
神经肽及其受体亚型在多种神经生理与病理过程中发挥了关键作用,尤其在肿瘤与神经系统交互调控中具有重要功能。然而,手性氨基酸突变对神经肽受体亚型选择性、结合特异性及酶学稳定性的调控机制尚未明确。本研究针对神经肽Y受体亚型(Y_1R和Y_2R)设计了特异性多肽,通过计算机辅助氨基酸突变与虚拟筛选策略筛选出具有预测受体选择性的候选序列。采用分子动力学模拟分析配体-受体复合物的构象稳定性与结构优势,并通过实验评估了新型配体的安全性、结合特异性及抗酶降解稳定性。本研究结果揭示了手性神经肽受体亚型选择性的结构基础,为构建具有高生物学活性的神经肽Y配体提供了理论依据与设计策略。
2025年12期 v.53 2125-2137页 [查看摘要][在线阅读][下载 1439K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:2 ] |[下载次数:4 ] |[网刊下载次数:0 ] - 唐芬;付丽娜;黄雅涓;马飞;方梦雪;张良晓;喻理;
伏马菌素B_1(FB_1)极易污染玉米和小麦等农产品,因此,开发灵敏、低成本、快速和高通量的FB_1筛查方法,对于保障农产品和食品安全至关重要。本研究合成了一种具有类过氧化物酶活性的Zn/Fe金属有机框架(Zn/Fe MOF)衍生碳纳米材料。将FB_1单克隆抗体与Zn/Fe MOF衍生碳纳米材料通过物理吸附偶联,构建了具有类过氧化物酶活性的免疫探针。将FB_1-牛血清白蛋白(BSA)偶联物包被在96孔板上,当加入待测样品和免疫探针时,包被抗原和样本中的FB_1与免疫探针中的抗体发生竞争免疫反应,生成抗原抗体复合物。结合在96孔板上的免疫探针的量与样本中目标物的量成反比。在过氧化氢存在的条件下,以3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)为底物,结合在孔板底部包被抗原上的具有类过氧化物酶活性的免疫探针可以催化TMB生成蓝色的氧化产物(oxTMB),因此,可以通过颜色信号变化对FB_1进行定量检测。优化了包被抗原浓度、免疫探针、孵育时间、提取液中甲醇浓度和缓冲液的pH值等实验参数,建立了用于粮食中FB_1检测的直接竞争纳米酶联免疫吸附法,对FB_1的检出限为0.073 ng/mL,检测范围为0.073~7.32 ng/mL。本方法具有良好的准确性和精密度,加标回收率为86.2%~109.6%,变异系数低于10%。对实际玉米和小麦样品中FB_1的检测结果与液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法的结果一致(相关系数为0.98~0.99)。本方法不仅提高了检测FB_1的灵敏度和效率,也扩大了MOF衍生碳纳米材料的应用范围。
2025年12期 v.53 2138-2151页 [查看摘要][在线阅读][下载 1279K] [引用频次:0 ] |[阅读次数:5 ] |[下载次数:35 ] |[网刊下载次数:0 ]